Özellikle RNA izolasyonu için kullanılır. Trizol yöntemi diğer yöntemler ile karşılaştırıldığında KRAL dır. Eğer Trizol yöntemi sizin bitki örneğinizde kullanılıyor ve çalışıyorsa kesinlikle kullanın derim. Tabi para olsa da İzolasyon kitleri kullansak.
Gerekli Malzemeler
- Sature edilmiş Fenol (Folin ayracı ile karıştırmayın. Sigma Kodu :
- Guanidine thiocyanate (Molekül Ağırlığı : 118,16 gr. Sigma Kod :3563461)
- Ammonium thiocyanate (Molekül Ağırlığı : 76,12 gr. Sigma Kod : 3595135)
- Sodium acetate (Molekül Ağırlığı : 82.03 gr. Sigma Kod: 3595639)
- Glacial acetic acid ( Molekül Ağırlığı : 60.05 . Sigma Kod: 506007)
- Glycerol (Molekül Ağırlığı : 92.09 gr. Sigma Kod: 635685)
- DNA-RNA Free Saf su (Molekül Ağırlğı : 18.02 gr. Sigma Kod: 2050024)
| Gerekli Kimyasal | Son Konsantrasyon |
| Fenol | %38 |
| Guanidine thiocyanate | 0.8 M |
| Ammonium thiocyanate | 0.4 M |
| Sodium acetate, pH 5.2 | 0.1 M |
| Glycerol | %5 |
- 24.6 gr sodium acetate tartıp 70 mL DNA-RNA free saf su içerisinde manyetik karışıtırı ile iyice çöz.
- Glacial acetic acid ile pH’ı 5.2 ye ayarla.
- 100 mL olacak şekilde üstünü saf su ile tamamla.
- Oda sıcaklığında saklayabilirsin.
1 L Trizol Çözeltisini Hazırlamak için
- 150 mL saf su içerisine 94.53 gr Guanidine thiocyanate ekle ve Manyetik karıştrıcı ile karıştırmaya başla.
- 30.45 gr Ammonium thiocyanate üzerine ilave et.
- 33.4 mL Sodium acetate stok çözeltisinden ekle.
- 50 mL Glycerol karışım içerisine ilave et.
- En son olarak 380 mL Fenol ilave et. (not: Fenol ilave ettiğinde karışımın soğuduğunu hissediyorsan doğru yoldasın demektir).
- Üzerine 1 L olacak şekilde saf su ile et.